小鼠抗牛血清白蛋白的制作与存放要求涉及多个步骤,包括免疫过程、血液采集、抗血清分离以及保存条件。以下是详细的介绍: 1.免疫过程
实验动物的选择:选择健康的小鼠作为实验对象,常用的品系包括Balb/C品系。
抗原注射:使用可溶性抗原牛血清白蛋白(BSA)进行免疫,小鼠每次免疫剂量为1~10μg,不超过0.5mL。通常采用腹腔注射的方法进行免疫。
多次免疫:为了提高抗体效价,通常需要进行三次间隔一周的中程免疫。
2.血液采集
采血方法:小鼠可以通过断尾取血或眶后静脉丛采血的方法进行。断尾取血时,将小鼠尾巴剪去约5mm,从尾根部向尾端按摩以收集血液。眶后静脉丛采血则需要使用毛细管刺入内眼角与眼球之间,轻轻旋转以刺破静脉丛。
3.抗血清分离
血液处理:采集的血液需要放入离心管中,斜置0.5-1小时,用无菌玻棒剥落瓶壁上的血*,然后放入冰箱4℃过夜。
离心分离:次日取出血液,去除血*,离心取上清液即为抗血清。
4.保存条件
添加防腐剂:在抗血清中加入叠氮钠至终浓度为0.1%,混匀后分装小管,作好标记。
低温保存:将分装好的抗血清放入-20℃或-80℃冰箱中保存待测。
小鼠抗牛血清白蛋白的制作与存放要求涉及严格的免疫过程、精确的血液采集技术、细致的抗血清分离步骤以及严格的保存条件。这些步骤对于确保抗体的质量和效价至关重要。